无菌！无酶！DEPC处理水质检报告出炉_检测_DNase_nm

近日，实验室随机抽取一批DEPC处理水做质量检测，主要针对细菌微生物、核酸酶DNase酶、RNase酶及蛋白酶等指标进行实验检验。

实验结果

OD值检测：260nm处、280nm处值均为零

核酸酶及蛋白酶检测：均未检出

qPCR检测：本批次Ct值无明显区别

本DEPC处理水是用DEPC（diethyl pyrocarbonate，焦碳酸二乙酯）处理过并经高温高压灭菌的超纯水，无色液体。可用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。

实验过程

一、实验试剂以及待测样品

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二、实验仪器

二、质检方案及检测结果

1、OD值

使用酶标仪检测DEPC处理水260nm、及280nm处OD值。

2、无DNase酶、RNase酶及蛋白酶

① 无DNase酶

注：Marker：5000bp；电泳：120V 电泳40 min

② 无RNase酶

使用RNase残留检测试剂盒（荧光探针法）进行检测，按照试剂盒说明书配制反应体系，反应总体系为25μL；

扩增程序如图：

扩增结果如图（原始曲线信号值）

③无蛋白酶

根据Bradford蛋白浓度测定试剂盒说明书操作：

3、qPCR

唾液核酸提取物（模板浓度为5 ng/μL）为模板进行qPCR，实验过程中（反转录和qPCR）所用到的水为库存+样品DEPC处理水，按照SR1110说明书中的步骤进行qPCR，具体检测如下：

qPCR体系：

qPCR程序：45个循环

扩增结果

样品扩增曲线

（左右滑动）

熔解曲线

（左右滑动）

4、结论

①OD值检测：260nm处、280nm处值均为零；

②核酸酶及蛋白酶检测：均未检出；

③ qPCR检测：本批次Ct值无明显区别。

发布于：广东省